仅需10秒,实现成年小鼠整脑三维成像!

  光片荧光显微镜(LSFM)使用与焦平面重合的“激发光片”对样品进行照射,并通过对样品进行轴向逐层扫描和二维成像的方式完成对样品的三维成像。由于激发光被光片限制在检测焦平面附近,LSFM具有出色的三维空间分辨率、层析能力、高成像速度和极低的光漂白特性,因而适用于各种生物样品的三维成像。

  LSFM所使用的激发光片的厚度,光片对激发光的约束能力和光片的大小分别决定了LSFM的三维分辨率、层析能力和成像视野的大小。因此,提高LSFM成像性能的关键在于如何创建薄且均匀的激发光片来覆盖成像视野,并尽可能地将激发光限制在焦平面附近。然而,由于光的衍射,不存在可以完美兼顾各方面要求的光片,所以使用LSFM对生物样品进行三维成像需要根据研究需求在三维空间分辨率、光学层析能力和成像视野之间进行权衡。

  锘海LS18平铺光片显微镜通过使用可以实时调节的平铺光片,不但克服了传统光片各方面性能的制约,还可以根据目标样品的特性和成像需求,在三维空间分辨率、光学层析能力和成像视野之间实现最佳平衡,使得显微镜能够灵活地应用于各种场景。与其他光片显微镜相比,LS18平铺光片显微镜具有多项先进功能:

  使用动态虚拟平铺光片进行样品照明,在保持成像视野的同时提高了三维空间分辨率,层析能力和成像效率。

  检测数值孔径、成像放大倍数和激发光片的尺寸以及平铺次数可以轻松调节,使显微镜能够以微米级到亚微米级的空间分辨率对厘米级的透明化样品进行成像,结合生物组织膨胀技术可进一步提高至百纳米级(~70nm)分辨率。

  可对用于样品照明的平铺光片进行实时预览和优化,并使用自动校准功能校正激发光片的各种对准误差,保证了成像的准确性、可靠性和易用性。

  LS18兼容各种透明化方法,并适用于不同形状、不同机械强度的生物组织的三维成像。

 

 

 

  锘海LS18平铺光片显微镜

  组织透明化技术的不断优化使更多的大体积生物组织(例如完整小鼠)的透明化和三维成像变为可能,随之而来的是用户对于超大视野、高速成像能力的极大需求,锘海LS18的最新升级满足了广大用户的这一需求。

  以拍摄完整成年小鼠脑为例,LS18仅需10秒的时间,即可以约10-20微米的三维空间分辨率完成整个小鼠脑的三维成像,并同步对成像结果进行三维重构和显示。尽管成像的三维空间分辨率相对较低,我们仍可以清晰地观察到目标组织的三维结构,从而决定是否需要对样品进行更高分辨率的三维成像。这一功能不但可以满足用户在对大体积样本进行高分辨率的三维成像前进行快速预览的需求,也可以很好地满足对厘米级大样本进行相对低分辨率的高通量三维成像的需求。

  锘海生命科学旨在为广大生命科学研究者提供更优秀和便捷的成像工具及成像技术。锘海将持续根据客户反馈,不断提高和优化产品性能来满足用户的各种需求!

 

  参考文献

  Gao L.Optimization of the excitation light sheet in selective plane illumination microscopy.Biomed Opt Express.2015;6(3):881-890.

  Chen Y,Li X,Zhang D,et al.A Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues.Cell Rep.2020;33(5):108349.

  Hobson CM,Guo M,Vishwasrao HD,Wu Y,Shroff H,Chew TL.Practical considerations for quantitative light sheet fluorescence microscopy.Nat Methods.2022;19(12):1538-1549.